2024年11月7日 · (图2 电转实现核酸等物质进入细胞示意图) 1.3 电转的关键因素. 电转相较于化转尽管能够克服化转的缺点,但也需要控制好一下条件,方能为确保转染成功:1)电压、2)电阻、3)电容、4)缓冲液、5)电击次数、6)细胞(包括感受态细胞)状态、7)细胞(包括感受态 …
有哪位大侠用过btx ecm830这个型号的电转仪么?初次使用,想与大家共同交流一下,谢谢!
最近要做细菌电转化,找遍了全校只有一台 BTX的Ecm2001电转仪,好像是专门做细胞的,功能倒是挺强大的,只不过好像说明书没有提到细菌转化,请问细胞电转仪可以用来电转细菌吗?
还是跟电压电阻什么的有关系呢?因为我按照电转仪系统预设的条件电转K562细胞,只是人家公司用的2mm的电转杯,我用的4mm的电转杯,电转效率超低,只有百分之几,想问一下这跟电转杯有关系吗?
我做电转有一个月了,可是电转化效率很低,仅转化空质粒pcomb3做阳性对照,才达到10的6,7次方,如果用于建库的话,是不是太低了?我用的电转仪是btx 的ecm830,参数:500v,20ms,一个脉冲。电容,电阻不可调。感受态菌为tg1。
各位大神我想问一下电转化农杆菌相关的问题。我们实验室用的是bio rad电转仪,当用空电转杯电转的时候电压能达到2.5kv,但是当放入EHA105和质粒混合时电击电流就变成了0.01kv,如图,请问这
2.电转仪测的电阻高的问题怎么解释。 3.甘油是否存在电阻过大的问题,是否洗菌体的时候用10%甘油比纯的去离子水要好?甘油的作用是什么?如果作用只是为了制好的感受态可以用来-70保存,我想用纯水洗菌试一试,排除甘油的影响。 多谢
啊?怎么会那?我觉得也许是你做的还不够熟练,我给你提两点一定要注意的问题:第一电转化后一定要立即加入SOC培养基,慢了大肠杆菌细胞死亡的较多,筛选不到重组子,第二感受太细胞的浓度一定要浓,50ml培养体系最后用500ul的10%的甘油溶解,如果你的电转仪达不到我说的条 …
电转后细胞死亡率约百分之30%,但是电转率只有百分之几。按道理说,公司生产这个仪器的时候摸索出的应该是电转率最高的条件啊,想问一下各位大神,会不会是因为电转杯的不同导致的呢?如果是,那我应该如何调整呢?电转杯的大小与哪个电转参数有关啊?
我用的是伯乐的电转仪,2mm电转杯,感受态先离心,沉淀+50ul(10%甘油+0.5M蔗糖)+3ug质粒直接调到金葡菌的条件去电转的。最近一次电转有许多菌落长,开始做菌落pcr也有阳性的,但是之后摇菌再去做就全部是阴性了。